ISO 15216-1-2017 PDF

Полное наименование и описание

Microbiology of the food chain — Horizontal method for determination of hepatitis A virus and norovirus using real-time RT‑PCR — Part 1: Method for quantification. Стандарт описывает горизонтальный метод количественного определения РНК вируса гепатита A (HAV) и норовирусов геногрупп I и II (NoV GI/GII) в ряде пищевых матриц и на пищевых поверхностях с использованием методов освобождения вируса, извлечения РНК и одношагового real‑time RT‑PCR с гидролизными зондами.

Аннотация

ISO 15216-1:2017 устанавливает унифицированную процедуру для количественной оценки содержания HAV и NoV GI/GII в мягких фруктах, листовых/стеблевых/луковичных овощах, бутилированной воде, двустворчатых моллюсках и на поверхностях, включая этапы освобождения вируса из образца, концентрирования/очистки и извлечения РНК (лизация гуанидиниум-тиоцианатом и адсорбция на кремнии), последующего обнаружения и количественной оценки методом real‑time RT‑PCR. Документ оговаривает ограничения применения метода и требования к контролям, калибровке и интерпретации результатов.

Общая информация

• Статус: Опубликован (международный стандарт, подтверждённый при ревизии стандартов).
• Дата публикации: 2017-03 (издание 1, март 2017).
• Организация-издатель: International Organization for Standardization (ISO).
• ICS / категории: 07.100.30 (Food microbiology).
• Редакция / версия: Edition 1 (ISO 15216-1:2017). Поправка ISO 15216-1:2017/Amd 1:2021 доступна отдельно.
• Количество страниц: 48 страниц (основная публикация).

Область применения

Стандарт предназначен для количественного определения HAV и норовирусов (GI и GII) в указанных пищевых матрицах и на пищевых поверхностях после применения описанных процедур освобождения и концентрирования вирусов. Стандарт прямо указывает, что метод не валидавался для всех возможных пищевых продуктов (включая многокомпонентные продукты) и не предназначен для обнаружения других вирусов без соответствующей валидации.

Ключевые темы и требования

• Матриц-специфичные процедуры освобождения вирусов (например: PEG/NaCl для мягких фруктов и овощей, протеиназа К для двустворчатых моллюсков, фильтрация/электрически заряженные мембраны и ультрафильтрация для воды, тампонные соскобы для поверхностей).
• Извлечение РНК: лизис гуанидиниум‑тиоцианатом и адсорбция на кремнии/силика с серией промывок для удаления ингибиторов ПЦР.
• Детекция и количественная оценка: одношаговый real‑time RT‑PCR с использованием гидролизных зондов, построение стандартной кривой и расчёт количества копий целевых последовательностей.
• Контроль качества и контролируемые образцы: процессный контроль (например, mengo‑вирус или другой контрольный вирус), внешние и отрицательные контроли, стандарты для калибровки и контроль ингибирования реакции.
• Интерпретация данных: расчёт коэффициента извлечения, оценка ингибирования RT‑PCR, пределы обнаружения и квантования, требования к воспроизводимости и точности (см. приложения и результаты валидационных исследований).

Применение и пользователи

ISO 15216-1:2017 применяют лаборатории по тестированию пищевых продуктов и воды, референс‑лаборатории, органы общественного здравоохранения и инспекции пищевой безопасности, а также частные лаборатории и производственные контрольные службы, которым требуется стандартизированная количественная оценка вирусного загрязнения (HAV и NoV) для надзора, расследования вспышек и оценки рисков.

Связанные стандарты

ISO 15216-2:2019 — часть 2 серии, описывает метод качественного обнаружения HAV и NoV (presence/absence). Ранее действовавшая техническая спецификация ISO/TS 15216-1:2013 была пересмотрена и заменена текущей редакцией 2017 года. Для ISO 15216-1:2017 выпущена поправка Amd 1:2021.

Ключевые слова

HAV, норовирус, norovirus GI, norovirus GII, real‑time RT‑PCR, количественная ПЦР, извлечение РНК, пищевые матрицы, двустворчатые моллюски, мягкие фрукты, овощи, бутилированная вода, контроль качества, стандарт.

FAQ

В: Что это за стандарт?

О: Международный стандарт ISO 15216-1:2017 задаёт методику количественного определения РНК вируса гепатита A и норовирусов (GI/GII) в ряде пищевых матриц и на пищевых поверхностях с применением освобождения вируса, концентрирования, извлечения РНК и real‑time RT‑PCR.

В: Что он регулирует?

О: Стандарт регламентирует последовательность лабораторных операций (подготовка образца, освобождение вируса, очистка и извлечение РНК, одношаговый real‑time RT‑PCR с гидролизными зондами), требования к контрольным материалам и процедурам калибровки, а также правила интерпретации количественных результатов и оценок эффективности извлечения и ингибирования.

В: Кто обычно использует?

О: Государственные референс‑лаборатории, частные контрольные лаборатории пищевой промышленности, академические и исследовательские лаборатории, органы здравоохранения и контроль качества продуктов питания при расследовании вспышек и мониторинге безопасности.

В: Он актуален или заменён?

О: ISO 15216-1:2017 является действующей редакцией, на неё выпущена поправка ISO 15216-1:2017/Amd 1:2021. Ранее существовавшая техническая спецификация ISO/TS 15216-1:2013 была заменена редакцией 2017 года. При необходимости пользователям рекомендуется проверять наличие последующих поправок или пересмотров у издателя.

В: Это часть серии?

О: Да — это часть серии ISO 15216; часть 2 (ISO 15216-2:2019) описывает метод качественного обнаружения (presence/absence), а дополнительные документы и поправки охватывают конкретизацию процедур и валидационные данные.

В: Какие ключевые слова?

О: HAV; Norovirus; Norovirus GI; Norovirus GII; real‑time RT‑PCR; quantitative PCR; RNA extraction; food matrices; shellfish; soft fruit; vegetables; bottled water; process control; standardisation.